该课题设置“禽流感病毒薄膜泵驱动微流控芯片检测仪研制及应用研究”等计7个子课题。采用薄膜泵(阀)流体驱动控制技术研制了低成本、便携化的RT-PCR微流控系统和斑点免疫微流控芯片系统,分别适于对禽流感病毒的现场诊断和高通量粗筛。在塑料芯片上完成核酸的自动化提取和扩增,所采用的薄膜微反应区PCR技术改善了常规PCR温度传输效果、缩短了循环时间,避免了繁杂操作而引起的交叉污染。斑点免疫与微流控技术的集成大幅度降低了成本、提高了应用价值。自行设计、筛选并合成了25个亚型禽流感病毒的特异性普通引物和169条人工基因合成引物以及50条特异性加尾引物和2条通用引物、52条特异性探针和3条质控探针,通过搭桥PCR技术成功完成了未获得毒株靶基因序列的人工合成,建立了多重PCR和基因芯片分型检测方法。开发出了3种相应检测试剂盒,可同时完成对25个亚型禽流感病毒的分型检测和鉴定,特异性强,敏感度达到2.47pfu。研制了用超声乳化改性方法制作的水溶性量子点并用于禽流感病毒探针的制备和检测。同时,还研发了实验室禽流感检测能力验证样品的制备技术,建立了既符合国际间实验室能力验证通用规则又符合动物检疫实验室特点的能力验证技术规范,口岸发生高致病性禽流感对入出境人员、染疫交通工具、商品和货物应急处理的技术规范。设计了具有诊断、进药、加热、加压、废物排放等功能的综合检测与处理厢车装备、多功能检疫处理车及隔离防护车。
由中国工程院院士夏咸柱领衔的鉴定组专家们一致认为该课题研究成果具有创新性,达到国际先进水平。